小鼠信号传导转录激活因子3(STAT3)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

产品特点

高灵敏度：最低检测浓度小于0.1 ng/ml，能够检测低浓度的STAT3蛋白。

高特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应，确保检测结果的准确性。

重复性好：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%，保证实验结果的可靠性。

操作简便：试剂盒提供完整的实验所需试剂和详细的实验步骤，便于实验操作。

试剂盒组成

预包被板：96T/48T，抗小鼠STAT3抗体包被的微孔板。

酶标记抗体：HRP标记的抗小鼠STAT3抗体。

标准品：重组小鼠STAT3蛋白，浓度梯度为100、50、25、12.5、6.25、3.125 ng/ml。

显色剂：TMB底物液。

终止液：1N硫酸。

洗涤液：20×浓缩洗涤缓冲液，需稀释后使用。

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法。预先包被捕获抗体的微孔中依次加入标本、标准品和HRP标记的检测抗体，经过温育和彻底洗涤后，加入TMB底物显色。TMB在HRP催化下转化为蓝色，加入终止液后变为黄色。颜色深浅与样品中的STAT3含量呈正相关，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

检测范围

检测范围：3.125 ng/ml – 100 ng/ml。

适用样本

血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清及相关液体样本。

注意事项

样本处理：避免溶血样本，标本应尽早提取，若不能立即实验，可-20℃保存，避免反复冻融。

试剂准备：试剂盒从冷藏环境中取出后需平衡至室温再使用；浓缩洗涤液需溶解结晶后稀释。

操作规范：避免交叉污染，更换枪头和移液槽；正确使用封板胶，确保孵育准确性。

结果判读：显色底物需避光保存，终止液加入顺序应与显色液一致，充分混匀。

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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