小鼠细胞角蛋白21-1片段（CYFRA21-1）elisa试剂盒 新品

小鼠细胞角蛋白21-1片段（CYFRA21-1）elisa试剂盒

产品简介:

实验原理

试剂盒采用双抗体夹心法，利用特异性抗体与标准品或样本中的CYFRA21-1结合，再加入HRP标记的检测抗体，形成免疫复合物。加入底物TMB后，HRP催化底物显色，通过酶标仪测定吸光度（OD值），与标准曲线比较，计算样本中CYFRA21-1的浓度。

主要组成

酶标包被板：预包被捕获抗体的微孔板。

标准品：已知浓度的CYFRA21-1，用于制作标准曲线。

HRP标记的检测抗体：与捕获抗体结合，形成免疫复合物。

底物溶液（TMB）：与HRP反应显色。

终止液：终止显色反应。

洗涤液：用于洗涤微孔板，去除未结合物质。

操作步骤

准备试剂和样本：平衡试剂盒至室温，准备标准品和样本。

加样：在微孔板中加入标准品、样本和检测抗体，温育后洗涤。

显色：加入底物溶液，避光孵育后加入终止液。

测定：使用酶标仪在450nm波长下测定OD值。

计算：根据标准曲线计算样本中的CYFRA21-1浓度。

性能特点

灵敏度高：可检测低至1.0 pg/mL的CYFRA21-。

特异性强：仅识别小鼠CYFRA21-1，与其他类似蛋白无交叉反应。

重复性好：批内变异系数小于10%，批间变异系数小于15%。

适用样本广泛：可用于血清、血浆、细胞培养上清等样本。

保存和有效期

保存条件：2-8℃避光保存。

有效期：一般为6个月至11个月。

注意事项

样本处理：避免使用含的防腐剂，样本需避免反复冻融。

操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染。

结果解读：仅用于科研，不用于临床诊断。

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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注意事项

科研用途：仅供科研实验使用，不可用于临床诊断。

操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染，确保实验结果准确。