小鼠胎球蛋白A（fetuin-A）elisa试剂盒 新品

产品介绍：

实验原理

试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA），在预包被抗小鼠胎球蛋白A抗体的微孔板中加入标准品、待测样本和HRP标记的检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加入底物后显色，颜色深浅与样本中的胎球蛋白A浓度呈正相关，通过酶标仪测定吸光度（OD值）计算浓度。

主要特点

高灵敏度：最低检测浓度小于10 ng/mL。

高特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

适用样本类型：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等。

精密度高：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。

试剂盒组成

预包被抗体的96孔板：用于固定抗体。

标准品：用于绘制标准曲线，确定样品浓度。

HRP标记的检测抗体：与样本中的胎球蛋白A结合。

洗涤液、显色液、终止液：用于洗涤、显色和终止反应。

操作步骤

加样：加入标准品或样本，37℃孵育。

洗涤：去除未结合物质。

加入检测抗体：孵育后洗涤。

显色：加入底物液，显色后加终止液。

读数：使用酶标仪在450nm波长下读取吸光度。

保存与稳定性

保存条件：2-8℃避光保存，有效期一般为6个月。

稳定性：在有效期内按推荐条件保存，活性降低率小于5%。

注意事项

样本处理：正确采集和保存样本，避免反复冻融。

操作规范：严格按说明书操作，避免不同批号试剂混用。

洗涤步骤：充分洗涤，避免非特异性结合。

结果解读：结合标准曲线，准确计算胎球蛋白A浓度。

应用领域

科研研究：用于小鼠胎球蛋白A在代谢、炎症等生理病理过程中的作用研究。

疾病诊断：辅助评估小鼠相关疾病的代谢水平。

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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