畸形细颈线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

畸形细颈线虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对畸形细颈线虫基因高度保守区域设计特异性引物。通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量分析。

试剂组成

扩增预混液：含SYBR Green染料、dNTPs、Taq DNA聚合酶等。

阳性对照：提供标准DNA片段（部分需用户按梯度稀释，如10^2~10^7拷贝/μL）。

阴性对照：无核酸酶水或缓冲液。

ROX参比染料（依机型需求提供）。

产品特点

高灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应的靶标核酸。

特异性强：引物经优化，与相近物种无交叉反应。

操作简便：即开即用，仅需提供待测核酸模板。

防污染设计：一管式闭管检测，减少气溶胶污染风险。

适用样本

适用于寄生虫基因组DNA提取物（如粪便、组织样本），仅限科研用途，不可用于临床诊断。

使用方法

样本处理：按标准方法提取DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

阳性对照稀释（以10倍梯度为例）：

取6管，分别标记为2~7号，每管加45 μL稀释液。

从初始阳性对照（10^8拷贝/μL）开始逐级稀释至10^2拷贝/μL。

PCR反应体系：

每20 μL反应体系含10 μL预混液、2 μL模板、8 μL无核酸酶水。

扩增程序：

预变性：95℃ 2分钟；

循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40~45循环，于60℃采集荧光信号）。

注意事项

实验分区操作，避免交叉污染。

阳性对照需独立稀释，使用带滤芯枪头。

不同机型可能需调整ROX染料添加量。

质量控制

阴性对照：应无扩增曲线（Ct值≥40或无信号）。

阳性对照：Ct值需在预期范围内，否则需重复实验。

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