巴氏细颈线虫染料法荧光定量PCR试剂盒

巴氏细颈线虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，试剂盒含预混优化引物及反应体系。

高特异性：基于巴氏细颈线虫保守序列设计引物，避免与其他病原体交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

防污染设计：一管式荧光定量PCR，减少操作污染风险。

兼容性：支持多数核酸纯化方法，提供阳性对照（无传染性DNA片段）以区分假阴性。

试剂盒组成

主要成分：

2×qPCR MagicMix（预混PCR试剂，含荧光染料）

荧光PCR专用模板稀释液

巴氏细颈线虫特异性引物混合物

阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）

使用说明书

自备试剂：

DNA模板（用户提供）

10×ROX校正染料（依机型需求选择添加）。

操作步骤

1. 阳性对照稀释（标准曲线制备）

标记6管（7~2号），每管加45μL稀释液。

梯度稀释阳性对照（从10⁸拷贝/μL起始，10倍稀释至10²拷贝/μL），每步换枪头，冰上保存。

2. 样品DNA制备

使用兼容的核酸纯化方法提取待测样本DNA，建议设置N+2个重复（含阳性/阴性对照）。

3. PCR反应体系

按20μL体系配制：10μL预混液、1μL引物、1μL模板DNA、8μL无核酸酶水（需ROX机型按说明添加）。

4. 上机检测

设置扩增程序：预变性（95℃, 3min）→ 40循环（95℃ 15s, 60℃ 30s，荧光采集）。

数据分析

定性检测：直接观察Ct值判断阳性/阴性。

定量检测：以标准曲线（阳性对照log浓度-Ct值）计算样本拷贝数。

注意事项

稀释阳性对照需在独立区域操作，避免污染。

保存及运输需全程-20℃，避免反复冻融。

不同试剂盒组分可能略有差异，请以实际产品说明书为准。

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