线颈细颈线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

线颈细颈线虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专为线颈细颈线虫（Nematodirus spp.）的核酸检测设计，适用于科研用途，不可用于临床诊断。试剂盒包含优化引物、阳性对照及反应体系所需组分，具有高灵敏度和特异性，可满足定性与定量检测需求。

技术特点

即开即用：仅需提供样品DNA模板即可进行检测。

高灵敏度：检测限可达数百拷贝/反应。

特异性强：引物基于保守序列设计，避免与其他病原体交叉反应。

双重功能：支持定性与定量分析，定量线性范围≥5个数量级。

内控设计：含阳性对照，有效区分假阴性结果。

操作步骤

标准曲线制备（以10E2-10E7拷贝/μL梯度为例）

稀释阳性对照：

标记6管（7-2号），每管加45 μL专用稀释液。

7号管加5 μL试剂盒提供的阳性对照（1×10E8拷贝/μL），震荡混匀，得10E7拷贝/μL标准品。

依次梯度稀释至10E2拷贝/μL，全程使用带芯枪头，避免污染。

保存：稀释后标准品置于冰上备用。

样品DNA制备

使用兼容的核酸纯化方法提取样本DNA，建议设置N+2个重复（含阳性与阴性对照）。

PCR反应

按20μL体系配制反应液，加入模板DNA。

上机运行程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40-45次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）。

数据分析

定量检测：以标准品Ct值的log值为横轴，绘制标准曲线，推算样品浓度。

注意事项

操作需在独立区域进行，避免气溶胶污染。

试剂盒不含活体阳性对照，仅提供无传染性DNA片段。

自备试剂：DNA模板、10×ROX（依机型需求）。

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