小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CYPA)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其他生物样本中CyPA浓度的科研工具，广泛应用于免疫学、分子生物学和生物化学等领域的研究。

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。具体流程如下：

使用纯化的小鼠CyPA特异性抗体包被微孔板，形成固相抗体。

加入待测样本和标准品，样本中的CyPA与固相抗体结合。

洗涤后，加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。

再次洗涤，加入底物TMB，HRP催化TMB产生蓝色产物，反应结束后加入终止液使溶液变为黄色。

在450 nm波长下测定吸光度（OD值），样本中CyPA浓度与OD值呈正相关，通过标准曲线计算浓度。

主要组成

典型配置（以96孔板为例）包括：

酶标包被板（12孔×8条）

标准品（不同浓度，用于绘制标准曲线）

样品稀释液、浓缩洗涤液、酶标试剂、显色剂A/B、终止液、封板膜、说明书等。

样本处理

血清：采集后室温静置2小时或4℃过夜，3000转离心10分钟，取上清。

血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，离心取上清。

组织匀浆：组织加生理盐水或PBS匀浆，离心取上清。

细胞上清：离心去除细胞碎片。

所有样本建议分装冻存于-20℃，避免反复冻融。

性能参数

灵敏度：最低检测浓度可达1.0 pg/mL以下。

检测范围：通常为0-400 pg/mL（依标准品配置而定）。

特异性：与其他结构类似物无交叉反应。

重复性：板内和板间变异系数均小于15%。

保存条件：2-8℃避光保存，有效期一般为6个月。

注意事项

试剂盒仅限科研使用，不得用于临床诊断。

所有操作需严格遵守说明书，避免交叉污染和实验误差。

标准品和样本需做复孔，确保结果可靠性。

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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