山羊分枝杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，无需额外配制主反应混合液。

高特异性：针对山羊分枝杆菌保守序列设计的引物，与其他病原体无交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应。

闭管检测：一管式荧光定量PCR设计，避免开盖导致的污染风险。

兼容性：适配常见荧光定量PCR仪，需根据机型自备10×ROX校正染料（部分机型需添加）。

规格及成分

| 成分 | 包装规格 | 保存条件 |

| 2×qPCR MagicMix | 500μL（棕色管）| -20℃避光保存 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1mL（黄盖） | -20℃保存 |

| 山羊分枝杆菌PCR引物混合物 | 100μL（白盖） | -20℃避光保存 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL（红盖） | -20℃保存 |

| 使用手册 | 1份 | 常温保存 |

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

自备试剂

DNA提取试剂（用于样本制备）。

10×ROX荧光校正染料（根据PCR仪器型号选择是否添加）。

使用方法

1. 阳性对照稀释（10²~10⁷拷贝/μL梯度制备）

注意：操作需在独立区域进行，避免污染。

标记6管离心管（7~2号），每管加入45μL模板稀释液。

取5μL阳性对照（10⁸拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到10⁷拷贝/μL标准品。

依次梯度稀释至2号管（10²拷贝/μL），每次更换枪头。

2. PCR反应体系（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×qPCR MagicMix | 10 |

| 引物混合物 | 2 |

| 模板DNA/稀释标准品 | 2 |

| ROX（可选） | 0.4 |

| 超纯水 | 补足至20 |

3. 扩增程序

预变性：95℃ 3分钟；

循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60℃~95℃，每0.5℃升温5秒。

注意事项

阳性对照需单独操作，避免污染其他组分。

反应体系需在冰上配制，减少非特异性扩增。

熔解曲线需呈现单一峰，以确认扩增特异性。

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