光滑念珠菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

光滑念珠菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用SYBR Green I染料法荧光定量PCR技术，专用于光滑念珠菌（Candida glabrata）核酸的高灵敏检测与定量。适用于临床样本、环境微生物及科研实验中真菌DNA的快速精准分析，具备高特异性、宽线性范围和良好的重复性。

组分列表

2×荧光PCR预混液：含优化缓冲体系、dNTPs及热启动DNA聚合酶。

阳性对照：10^8拷贝/μL光滑念珠菌特异性DNA片段（非活体样本，避免生物污染风险）。

阴性对照：无核酸酶水。

荧光PCR专用模板稀释液：用于标准品梯度稀释。

使用说明书（当前文档）。

操作步骤

标准品稀释（示例：10^2–10^7拷贝/μL梯度制备）

分区操作：在独立洁净区域进行，避免交叉污染。

稀释流程：

标记6管，编号7至2，每管预加45 μL稀释液。

7号管加入5 μL原液（10^8拷贝/μL），涡旋混匀，得10^7拷贝/μL标准品。

依次梯度稀释至2号管（10^2拷贝/μL），每次更换枪头，混匀后冰上保存。

PCR反应体系配制

每20 μL反应体系：

10 μL 2×预混液

0.4 μL上下游引物（终浓度0.2 μM）

2 μL模板DNA

补足无核酸酶水至终体积。

扩增程序

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）

熔解曲线分析：60–95℃，每0.5℃递增，验证产物特异性。

性能参数

灵敏度：最低检测限10拷贝/μL（DNA模板）。

特异性：不与近平滑念珠菌（C. parapsilosis）等其他常见病原体交叉反应。

稳定性：预混液4℃保存24小时性能无显著变化。

线性范围：10^2–10^7拷贝/μL（R²≥0.99）。

注意事项

阳性对照需单独处理，避免污染实验环境。

推荐使用带滤芯枪头及分区操作台。

熔解曲线出现多峰需排查引物二聚体或非特异扩增。

本产品仅限科研用途。

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