小鼠巨噬细胞刺激蛋白(MSP)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

实验原理

试剂盒采用双抗体夹心法，预先包被MSP抗体的微孔板依次加入标准品、待测样本和HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。加入底物TMB显色，颜色深浅与MSP浓度呈正相关，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。

产品组成

酶标包被板：预包被MSP抗体的微孔板。

标准品：不同浓度梯度的MSP标准品溶液。

酶标试剂：HRP标记的MSP检测抗体。

样本稀释液：用于稀释待测样本。

洗涤液：用于洗涤微孔板。

显色底物：A液和B液，用于显色反应。

终止液：终止显色反应。

产品性能

检测范围：通常为0.156-10ng/mL。

灵敏度：最低检测浓度小于10pg/mL。

特异性：不与其他结构类似物交叉反应。

重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。

操作步骤

准备试剂盒：取出所需板条，剩余部分密封保存于2-8℃。

加样：加入标准品和待测样本，37℃孵育。

洗涤：弃去液体，洗板。

加抗体：加入生物素化抗体，孵育后洗涤。

加酶结合物：加入酶结合物，孵育后洗涤。

显色：加入底物溶液，避光孵育，显色后加入终止液。

测定：酶标仪测定OD值，计算样本浓度。

注意事项

保存条件：未开封试剂盒保存于2-8℃，有效期6个月。

操作规范：严格按说明书操作，避免交叉污染，使用前恢复试剂至室温。

安全防护：操作时戴手套、穿工作衣，避免接触皮肤和衣物，废弃物按传染物处理。

适用样本

血清、血浆、细胞培养上清液、组织等

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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