小鼠金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

产品特点

高灵敏度：检测灵敏度可达22pg/ml。

特异性强：与人TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3、TIMP-4及大鼠TIMP-1等无交叉反应。

重复性好：板内、板间变异系数均小于10%。

检测原理

采用双抗体夹心ELISA法。预包被的小鼠TIMP-1特异性单克隆抗体与样本中的TIMP-1结合，加入生物素化的抗TIMP-1抗体形成免疫复合物，再加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，通过显色反应，用酶标仪测定吸光度值，实现定量检测。

适用样本

血清、血浆、细胞培养上清液等。

操作步骤

样本准备：按要求收集并处理样本，如离心去除颗粒物，分装冻存等。

试剂盒准备：取出所需板条，剩余板条密封保存；试剂盒组分室温平衡后使用。

加样：设置标准品孔和样本孔，加入标准品或样本及相应的稀释液。

温育：加入HRP标记的检测抗体，封板后37℃温育60分钟。

洗板：手工或自动洗板机洗板5次，去除未结合物质。

显色与终止：加入显色剂，温育显色后加入终止液终止反应。

测定：酶标仪测定450nm波长下的吸光度值。

计算：根据标准曲线计算样本中TIMP-1的浓度。

注意事项

试剂盒保存于2-8℃，使用前室温平衡。

标准品需按说明书要求稀释，避免反复冻融。

严格按操作步骤进行，控制温育时间、加液量及顺序。

样本中待测物浓度过高时需稀释，最终结果需乘以稀释倍数。

产品包装

通常为96次检测量，包括预包被板、标准品、抗体、显色试剂等。

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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