仙台病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

仙台病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用SYBR Green I染料法，专为仙台病毒（Sendai Virus）RNA的高灵敏度、高特异性检测设计。通过一步法实现反转录（RT）与实时荧光定量PCR（qPCR）的整合，避免开盖污染风险，适用于临床样本、细胞培养物或环境样本中的病毒核酸定量分析。

检测原理

反转录阶段：耐热逆转录酶将病毒RNA高效转化为cDNA。

qPCR扩增：UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase在优化缓冲体系中扩增靶标，SYBR Green I嵌入双链DNA后发射荧光信号，通过Ct值定量病毒载量。

产品组分

2× Advanced SG Buffer：含SYBR Green I染料的预混反应液

UH Enzyme Mix：逆转录酶与热启动Taq聚合酶复合物

RNase-free H2O：无核酸酶水

（注：具体组分比例需根据规格选择，如20 T或200 T装量。）

性能参数

灵敏度：可检测低至0.1 pg高表达病毒RNA或单拷贝DNA。

特异性：熔解曲线分析确保扩增产物单一性。

稳定性：预混液4℃保存24小时性能无显著变化。

兼容性：适配主流qPCR仪（No/Low/High Rox平台）。

操作步骤

反应体系配制：按比例混合缓冲液、酶混合物、引物及模板RNA。

程序设置：

反转录：50℃ 15分钟

预变性：95℃ 5分钟

qPCR循环：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（信号采集），共40循环

数据分析：

定量：通过标准曲线计算病毒RNA浓度。

定性：Ct值≤35为阳性，≥40为阴性，35-40需复测。

注意事项

保存条件：-20℃长期保存，避免反复冻融；4℃可稳定3个月。

仅限研究用途，不可用于临床诊断。

建议使用无RNase耗材，防止RNA降解。

应用案例

已验证适用于293T细胞总RNA中的病毒靶标检测，扩增效率＞90%，重复性CV＜5%。

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