小鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

检测原理

检测方法：采用双抗体夹心法，以纯化的MMP-3抗体包被微孔板，依次加入MMP-3和HRP标记的抗体，形成复合物。加入底物TMB显色，颜色深浅与MMP-3浓度正相关，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），并利用标准曲线计算浓度。

产品特点

灵敏度：最低检测限为0.1 ng/mL或0.078 ng/mL（不同品牌可能略有差异）。

特异性：不与结构类似物交叉反应，确保检测结果的准确性。

重复性：板内和板间变异系数均较低，保证结果的可靠性。

线性范围：通常为0.312-20 ng/mL或类似范围。

适用样本：包括血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等。

操作步骤

准备试剂与样本：平衡试剂盒至室温，准备标准品和待测样本。

加样：设空白孔和标准品孔，加入样本和标准品。

温育：37℃温育30分钟，使抗体-抗原复合物形成。

洗涤：弃去液体，洗涤5次，去除未结合物质。

加酶标抗体：加入HRP标记的抗体，再次温育和洗涤。

显色：加入底物TMB，避光显色10分钟。

终止反应：加入终止液，终止显色。

测定OD值：使用酶标仪在450nm波长下测定各孔OD值。

计算浓度：根据标准曲线计算样本中MMP-3浓度，乘以稀释倍数。

注意事项

样本处理：避免使用含的样本，因其抑制HRP活性。

试剂保存：试剂盒需避光防潮保存，不同批号组分不得混用。

操作规范：严格按说明书操作，确保加样准确，避免交叉污染。

应用领域

科研研究：用于研究MMP-3在组织重塑、炎症、肿瘤侵袭等过程中的作用。

药物筛选：评估药物对MMP-3表达的影响。

生物标志物检测：作为潜在的生物标志物，用于疾病诊断和预后评估。

试剂与样本准备阶段：

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。

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