小鼠骨涎蛋白(BSP)ELISA试剂盒 新品

小鼠骨涎蛋白(BSP)ELISA试剂盒

产品简介:

检测原理

双抗体夹心法：微孔板预先包被抗小鼠BSP的捕获抗体，依次加入标准品或样本，BSP与固相抗体结合。随后加入生物素标记的检测抗体，形成免疫复合物。加入链霉亲和素-过氧化物酶复合物（ABC），与生物素结合。加入底物TMB显色，颜色深浅与BSP浓度正相关，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），并利用标准曲线计算浓度。

产品特点

灵敏度高：最低检测限通常小于1 ng/mL。

特异性强：不与小鼠其他细胞因子交叉反应。

重复性好：板内和板间变异系数均小于10%。

适用样本：包括血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等。

试剂盒组成

预包被抗体的96孔板。

标准品。

生物素标记抗体。

ABC（亲和素-过氧化物酶复合物）。

洗涤液、底物液、终止液等。

操作步骤

准备试剂和样本：平衡试剂盒至室温，制备标准品和待测样本。

加样：设置标准品孔和样本孔，加入相应试剂。

温育与洗涤：按步骤温育并彻底洗涤，去除未结合物质。

显色与终止：加入底物显色，再加入终止液终止反应。

测定与计算：测定OD值，绘制标准曲线，计算样本浓度。

注意事项

样本处理：避免使用含的样本，因其抑制HRP活性。

试剂保存：试剂盒需避光防潮保存，不同批号组分不得混用。

操作规范：严格按说明书操作，确保加样准确，避免交叉污染。

应用领域

科研研究：用于研究BSP在骨代谢、肿瘤侵袭等过程中的作用。

药物筛选：评估药物对BSP表达的影响。

生物标志物检测：作为潜在的生物标志物，用于疾病诊断和预后评估。

如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

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注意事项

科研用途：仅供科研实验使用，不可用于临床诊断。

操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染，确保实验结果准确。