贝氏贝诺孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专为检测贝氏贝诺孢子虫(Besnoitia besnoiti)而设计，适用于科研用途，不可用于临床诊断。试剂盒包含优化的引物系统，可特异性识别贝氏贝诺孢子虫保守序列，灵敏度可达几百拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级。

产品特点

即开即用：用户只需提供DNA模板即可进行检测

高特异性：引物针对贝氏贝诺孢子虫保守序列设计，与其他病原体无交叉反应

高灵敏度：检测下限可达几百拷贝/反应

防污染设计：一管式反应体系减少后续污染风险

质量控制：提供阳性对照用于区分假阴性结果

双重应用：既可用于定性检测，也可用于定量分析

规格与成分

本试剂盒为50次20μL反应体系配置，包含以下组分：

2×qPCR MagicMix：500μL（棕色管）

荧光PCR专用模板稀释液：1mL（黄盖）

贝氏贝诺孢子虫PCR引物混合物：100μL（白盖）

贝氏贝诺孢子虫PCR阳性对照(1×10⁸拷贝/μL)：50μL（红盖）

使用手册：1份

运输与保存

低温运输

-20℃保存

有效期12个月

自备试剂

DNA模板

10×ROX（根据PCR仪器型号决定是否需要）

使用方法

阳性对照稀释（以10²-10⁷拷贝/μL六个梯度为例）

在独立区域操作，标记6个离心管为7-2号

每管加入45μL荧光PCR专用模板稀释液

7号管加入5μL阳性对照(1×10⁸拷贝/μL)，震荡1分钟，得到1×10⁷拷贝/μL稀释液

依次进行10倍系列稀释至6个梯度，每次更换枪头

稀释完成后置于冰上备用

PCR反应体系配制

在反应管中按以下比例配制反应混合液（以20μL体系为例）：

2×qPCR MagicMix：10μL

引物混合物：2μL

模板DNA：2μL

ROX（根据仪器要求）：适量

无菌超纯水：补至20μL

PCR反应程序

推荐使用以下扩增程序：

预变性：95℃ 3分钟

循环阶段（40个循环）：

变性：95℃ 15秒

退火/延伸：60℃ 60秒

熔解曲线分析（根据仪器要求设置）

注意事项

操作需严格按照说明书进行

使用前所有组分应完全融化，混匀并短暂离心

反应液需避光保存

避免反应体系中存在气泡，确保管盖密封

使用一次性吸头、手套和专用工作服

样本处理、试剂配制和加样需在不同区域进行

实验后工作台和仪器需用10%次氯酸或75%酒精消毒

所有试剂盒组分应作为潜在污染物处理

质量控制

阴性对照：建议每次实验设置无模板对照(NTC)

阳性对照：使用试剂盒提供的阳性对照验证实验有效性

标准曲线：建议每次实验建立标准曲线用于定量分析

结果判读

Ct值≤35且熔解曲线单一峰：判为阳性

Ct值>35或熔解曲线异常：需重复检测

无扩增信号：判为阴性

产品声明

本产品仅供科研使用，不能用于临床诊断或其他用途。

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