多食棘阿米巴属通用染料法荧光定量PCR试剂盒

多食棘阿米巴属通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

本试剂盒采用SYBR Green染料法实时荧光PCR技术，针对多食棘阿米巴属通用基因高度保守区域设计特异性引物。在PCR扩增过程中，SYBR Green染料与双链DNA结合释放荧光信号，通过实时监测荧光强度变化，实现对靶标核酸的定性和定量分析。

试剂组成

| 组分名称 | 规格 |

| 多食棘阿米巴属通用扩增液 | 50μL×1管 |

| 多食棘阿米巴属通用反应液 | 950μL×1管 |

| 阳性质控品 | 50μL×1管 |

| 阴性质控品 | 50μL×1管 |

| 说明书 | 1份 |

注意事项：

不同批号试剂组分不可混用。

试剂盒内组分可满足标称检测次数。

储存条件及有效期

储存条件：-20℃±5℃，避光保存，避免反复冻融（建议冻融次数＜7次）。

有效期：12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI系列（如7500、StepOnePlus）

MX3000P/3005P

LightCycler（Roche）

Bio-Rad（CFX系列）

Eppendorf（Mastercycler ep realplex）

需自备耗材：

无DNA/RNA酶的1.5mL离心管、0.2mL PCR反应管

滤芯吸头（10μL、200μL、1000μL）

离心机、振荡混合器、移液器

样品要求

样本类型：胃液分泌物、胃液呕吐物、培养物等，采集需参照《临床微生物样本采集规范》。

保存条件：

短期：-20℃±5℃

长期：-70℃以下（保存期≤6个月）

运输要求：2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

操作步骤（基于SYBR Green法）

反应体系配制（冰上操作）：

按比例混合扩增液、反应液及模板DNA（具体体积参考说明书）。

PCR程序设置：

预变性：95℃ 3-5分钟

循环扩增（35个循环）：

变性：93℃ 40秒

退火：58℃ 30秒

延伸：72℃ 60秒

终延伸：72℃ 7分钟

数据分析：根据仪器软件生成扩增曲线和Ct值判定结果。

质量控制

每批次实验需同时检测阳性质控品（应呈阳性扩增）和阴性质控品（无扩增信号）。

注意事项

实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免交叉污染。

废弃样本及耗材需按生物危害废物处理。

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