肠出血性大肠杆菌O157:H7血清型染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

肠出血性大肠杆菌O157:H7血清型染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于SYBR Green I染料法荧光定量PCR技术，专用于体外定性或定量检测肠出血性大肠杆菌O157:H7（EHEC O157:H7）的DNA。适用于食品（如牛肉、生鲜蔬菜）、环境（如水体）及临床样本（如粪便）的检测，仅限科研或兽医诊断使用，不可用于人类临床诊断。

核心原理

荧光标记：SYBR Green I染料特异性嵌入双链DNA小沟，激发后发射荧光信号。

信号扩增：PCR循环中，荧光强度与扩增产物量成正比，实现实时定量。

熔解曲线分析：通过产物熔解温度（Tm值）区分特异性扩增与非特异性产物（如引物二聚体）。

试剂盒组成

| 成分 | 规格/包装 | 功能说明 |

| 2×qPCR Buffer | 500μL（红盖） | 含dNTPs、Mg²⁺及优化缓冲体系 |

| SYBR Green I染料 | 50μL（绿色管） | 荧光信号标记染料 |

| O157:H7特异性引物混合液 | 100μL（白盖） | 针对rfbE/fliC基因设计，高特异性 |

| 阳性对照（人工DNA） | 50μL（黄盖） | 1×10⁸拷贝/μL，用于实验质控 |

| 阴性对照（超纯水） | 1mL（亮黄色） | 监控交叉污染 |

| DNA释放剂（试用装） | 50次（绿盖） | 简化样本前处理 |

性能特点

高特异性：引物针对O157:H7血清型特有基因（rfbE/fliC），无交叉反应。

高灵敏度：最低检测限可达10拷贝/μL。

即用型设计：预混PCR缓冲液，操作简便，减少人为误差。

质控完善：提供阴阳性对照，确保结果可靠性。

操作流程

样本处理：使用DNA释放剂裂解样本或常规提取DNA。

反应体系配制：按比例混合缓冲液、引物、染料及模板DNA。

PCR扩增：按标准程序（95℃预变性→40循环扩增→熔解曲线分析）运行。

数据分析：通过Ct值定量，熔解曲线验证产物特异性。

注意事项

存储条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

批号一致性：不同批号组分不可混用。

污染防控：阳性对照需单独存放，操作区严格分区。

适用范围：仅限科研，临床诊断需选择合规产品。

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