传染性脓疱皮炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

传染性脓疱皮炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，用于特异性检测传染性脓疱皮炎病毒（CPDV）核酸，适用于临床样本（如脓疱液、痂皮或血液）及科研分析。通过实时监测荧光信号（如SYBR Green I染料），实现病毒核酸的定性与定量检测，具有高灵敏度、高特异性及防污染设计特点。

技术参数

检测原理：SYBR Green I染料法，靶向CPDV保守基因序列（如B2L或VIR基因）。

灵敏度：检测限低至100拷贝/毫升。

特异性：引物经优化设计，与羊口疮病毒、口蹄疫病毒等无交叉反应。

适用样本：组织、体液或培养物提取的DNA。

试剂盒组成

| 组分 | 规格 | 功能说明 |

| 2×qPCR预混液（含染料） | 500 μL（棕色管） | 含dNTPs、缓冲液及SYBR Green I |

| CPDV特异性引物混合液 | 100 μL（白盖） | 靶向CPDV基因的引物对 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） | 重组质粒DNA，用于标准曲线 |

| 阴性对照 | 50 μL（无色盖） | 无菌水，监控污染 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 样本及对照品稀释 |

| 使用手册 | 1份 | 操作流程及质控标准 |

操作流程

样本制备

提取样本DNA，推荐使用商业化DNA提取试剂盒。

阳性对照需梯度稀释（10²–10⁷拷贝/μL）以绘制标准曲线。

PCR反应体系（20 μL）

预混液：10 μL

引物混合液：2 μL

模板DNA：2 μL

超纯水：补足至20 μL

扩增程序

预变性：95℃ 5分钟

循环扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 45秒（采集荧光），共40个循环。

适用仪器

ABI 7500、Bio-Rad CFX96等主流荧光定量PCR仪。

结果判读

定性检测：Ct值 ≤ 35且扩增曲线呈S型，判为阳性。

定量分析：通过标准曲线计算样本病毒载量。

注意事项

本试剂盒仅限科研使用，不可用于临床诊断。

操作时需穿戴防护装备，避免气溶胶污染。

试剂保存于-20℃，避免反复冻融。

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