李斯特菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

李斯特菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品简介

本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术，通过特异性引物和荧光探针靶向李斯特菌属（Listeria spp.）的保守基因序列，实现对食品、环境样本或临床标本中李斯特菌核酸的快速、高灵敏度检测。适用于定性及定量分析，定量线性范围覆盖1E1–1E6拷贝/μL（5个数量级）。

检测原理

扩增原理：反应体系中探针与目标DNA结合后，Taq酶在延伸阶段分解探针释放荧光信号，通过实时监测荧光强度变化生成扩增曲线，判定目标菌是否存在。

染料法特性：采用通用型荧光染料（如FAM通道兼容），适配多数荧光定量PCR仪（如ABI7500、LC480等）。

试剂盒组成

| 组分名称 | 规格 | 主要成分 |

| 2×Probe qPCR MasterMix | 1 mL | 含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等 |

| 李斯特菌通用引物-探针干粉 | 50T | 特异性引物及荧光标记探针 |

| 阳性对照（无传染性） | 30 μL | 1E7拷贝/μL DNA片段 |

| 阴性对照 | 100 μL | 无核酸酶水 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 用于标准品梯度稀释 |

| 使用说明书 | 1份 | 操作流程及注意事项 |

注：需自备样本DNA提取试剂盒、超纯水及离心管等耗材。

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：24个月（未开封状态下）。

运输条件：低温干冰运输。

适用仪器

兼容具备FAM荧光通道的实时荧光定量PCR仪，包括但不限于：

ABI 7500

Roche LightCycler 480

Bio-Rad CFX96

其他等效机型

操作流程

样本处理：

使用商品化核酸提取试剂盒提取样本DNA，建议纯化后浓度≥10 ng/μL。

标准品稀释：

阳性对照按10倍梯度稀释（1E1–1E6拷贝/μL），独立操作避免污染。

PCR反应体系配制（20μL/反应）：

2×MasterMix 10 μL

引物-探针混合液 2 μL

模板DNA 2 μL

超纯水补至20 μL

扩增程序：

预变性：95℃ 3 min

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（采集荧光）

性能指标

灵敏度：最低检出限≤10拷贝/反应。

特异性：对单增李斯特菌（L. monocytogenes）及其他李斯特菌属（如L. innocua）均有效，无交叉反应。

重复性：CV值≤5%。

注意事项

实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。

阳性对照为DNA片段，不含活菌，无需生物安全防护。

若用于定量分析，需同步运行标准曲线。

声明：本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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