鞭虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品基本信息

产品名称：鞭虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒

英文名称：Trichuris spp. SYBR Green qPCR Kit

包装规格：50次/盒

适用物种：绵羊鞭虫（Trichuris ovis）及其他鞭虫属（Trichuris spp.）

检测方法：SYBR Green染料法实时荧光定量PCR

检验原理

试剂盒针对鞭虫保守基因序列（如18S rRNA或ITS区）设计特异性引物，通过实时荧光PCR技术扩增目标核酸。SYBR Green染料与双链DNA结合后释放荧光信号，通过仪器监测荧光强度，实现定性和定量分析。

试剂组成

核心组分：

PCR预混液（含DNA聚合酶、dNTPs、SYBR Green染料）

鞭虫特异性引物混合液

阳性质控品（已知浓度DNA）

阴性质控品（超纯水）

其他：说明书、核酸释放剂（部分提供试用装）。

储存条件与有效期

储存：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。

有效期：12个月。

运输：低温（2~8℃）冰袋运输，阳性对照需单独存放。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 系列（如7500、StepOnePlus）

Bio-Rad（CFX系列）

Roche LightCycler

Eppendorf Mastercycler

样本要求

样本类型：粪便、组织、胃液分泌物等。

处理要求：

避免交叉污染，采集后立即检测或-20℃短期保存（长期保存需-70℃）。

使用商业化DNA提取试剂盒（如Qiagen、TIANGEN）提取核酸。

操作流程

试剂准备：

预混液分装至PCR管（20μL/管），冰上操作。

加样：

每管加入18μL DNA模板（样本/对照），顺序：阴性对照→样本→阳性对照。

PCR程序：

预变性：95℃ 3分钟（1循环）

扩增：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环，退火时采集荧光信号）。

结果判定

阳性：Ct值≤35，扩增曲线呈S型。

阴性：无Ct值或Ct值＞45。

可疑：35<Ct值≤45，建议重复检测。

注意事项

防污染：

严格分区操作（试剂准备、样本处理、扩增区）。

使用滤芯吸头及专用耗材。

质控：

每批次实验需包含阴/阳性对照。

避免试剂反复冻融。

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