人细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)ELISA试剂盒

一、技术原理与创新特性：

高特异性检测系统：

表位精准识别：采用抗人CYFRA21-1 KS19.1表位单抗（克隆BM19.21）作为捕获抗体，结合KS19.2表位检测抗体（克隆KS19.2），可特异性识别细胞凋亡释放的片段

稳定性优化：特殊缓冲体系（含5mM DTT）维持片段构象稳定性

抗干扰设计：添加广谱角蛋白阻断剂（与CK18交叉反应<0.1%）

2025年技术升级：

新增循环肿瘤DNA（ctDNA）联检功能

标准品溯源至IRMM参考物质（ERM-DA483/IFCC）

微孔板采用仿生上皮基底膜涂层（批内CV降至2.1%）

二、试剂盒配置与关键参数

标准组件清单：

预包被96孔板（12条×8孔独立包装，真空铝箔密封）

重组人CYFRA21-1标准品（6梯度：0.1-100 ng/mL，含质谱鉴定证书）

检测系统：

碱性磷酸酶标记二抗（4℃稳定12个月）

CDP-Star化学发光底物（灵敏度达0.05 ng/mL）

专用血清稳定剂（含蛋白酶抑制剂cocktail）

性能指标：

参数  规格  临床意义

检测范围  0.1-100 ng/mL  覆盖早期至晚期肿瘤浓度

灵敏度  0.05 ng/mL  可检测I期肺癌

精密度  板内CV<4%，板间CV<7%  符合NCCLS EP5-A2

抗溶血性  耐受10g/L血红蛋白  适合胸水样本

三、实验操作标准化流程

样本处理关键点：

血清采集：必须使用无抗凝剂真空管（避免纤维蛋白干扰）

稳定性数据：

4℃保存≤72小时

-20℃可保存2年（避免反复冻融>3次）

特殊处理：

胸腹水样本需3000×g离心15分钟

放疗后样本需标注治疗时间

优化操作步骤：

离心条件：室温3000×g离心15分钟（避免冷沉淀）

加样策略：采用棋盘式加样顺序

关键孵育：37℃恒温振荡（600rpm）60分钟

信号读取：化学发光模式（积分时间300ms）

四、临床应用与科研价值

诊断临界值：

非小细胞肺癌：血清>3.3 ng/mL（敏感性75%，特异性95%）

膀胱癌复发监测：尿液>4 ng/mL预示复发风险（HR=2.3）

疗效评估：治疗2周后下降>36%预示客观缓解

2025年研究突破：

发现CYFRA21-1通过HMGB1-RAGE通路促进肿瘤转移

基于CYFRA21-1/ctDNA的液体活检方案获FDA突破性设备认定

纳米传感器实现呼气中CYFRA21-1实时检测

五、质量控制与问题处理

质控标准：

标准曲线要求：4参数拟合R2≥0.995

必检参数：

空白OD值<0.1

质控品回收率90-110%

公司正在出售的产品：

ELISA试剂盒的主要优点缺点：

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感