西方蜜蜂微孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品用途

专用于科研领域，快速、灵敏检测西方蜜蜂微孢子虫（Nosema apis）的核酸，适用于定性和定量分析。

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，操作简便。

高特异性：引物针对西方蜜蜂微孢子虫保守序列设计，与其他病原体无交叉反应。

灵敏度高：检测限低至几百拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。

内置对照：提供无传染性的DNA片段作为阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），便于区分假阴性结果。

规格及成分

| 成分 | 包装规格 | 保存条件 |

| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | -20℃避光保存 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | -20℃保存 |

| PCR引物混合物 | 100 μL（白盖） | -20℃避光保存 |

| PCR阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（红盖） | -20℃保存 |

| 使用手册 | 1份 | 随试剂盒保存 |

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存期限：-20℃保存，有效期12个月，避免反复冻融。

自备试剂

DNA模板（需用户提供）。

10×ROX校正染料（根据荧光定量PCR仪器型号选择，详见手册）。

使用方法

1. 阳性对照稀释（标准曲线制备）

注意：操作需在独立洁净区域进行，避免污染。

标记6支离心管（编号7至2），每管加入45 μL模板稀释液。

取5 μL阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到10⁷拷贝/μL标准品。

依次梯度稀释至10²拷贝/μL（6个浓度点），每步更换枪头，冰上暂存。

2. PCR反应体系（20 μL体系）

2×qPCR MagicMix：10 μL

引物混合物：0.4 μL

模板DNA：2 μL

ROX（按需添加）：0.4 μL

超纯水：补至20 μL

3. 扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |

| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | |

| 荧光采集 | 60℃ | 30 sec | |

注意事项

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

稀释阳性对照时需严格分区操作，避免污染。

建议使用带滤芯枪头，减少气溶胶污染风险。

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