牛莫拉氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

检验原理

试剂盒针对牛莫拉氏菌基因高度保守区域设计特异性引物，通过实时荧光PCR技术扩增目标核酸。SYBR Green染料与双链DNA结合释放荧光信号，仪器实时监测荧光强度，实现定性及定量分析（线性范围≥5个数量级）。

试剂盒组成

牛莫拉氏菌扩增液：50μL×1管

牛莫拉氏菌反应液：950μL×1管

阳性质控品：50μL×1管（1×10⁶拷贝/μL）

阴性质控品：50μL×1管（无核酸酶水）

说明书：1份

注：不同批号组分不可混用。

储存与运输

储存条件：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。

有效期：12个月。

运输：低温冰袋（2~8℃）运输。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI系列

MX3000P/3005P

LightCycler

Bio-Rad、Eppendorf等

样本要求

样本类型：胃液分泌物、呕吐物或培养物（参照《临床微生物样本采集规范》）。

保存条件：

短期：-20℃

长期：-70℃（≤6个月）

运输：2~8℃冰袋，严禁反复冻融。

操作步骤

样本制备（需设置N+2个提取反应，含阳性/阴性对照）：

阳性对照：10μL阳性质控品+水至样本体积。

阴性对照：无核酸酶水。

使用兼容的DNA提取试剂盒纯化样本。

PCR扩增：

反应体系：20μL（按说明书比例混合试剂）。

扩增程序：按仪器推荐设置（通常包括预变性、循环扩增、熔解曲线分析）。

结果分析：

电泳验证：取5~10μL产物于1.5%~2.0%琼脂糖凝胶电泳，预期条带200bp。

阴性对照要求：若阴性对照出现扩增，表明污染，实验无效。

注意事项

实验分区操作（样本处理区、PCR准备区、扩增区），避免交叉污染。

使用无DNA/RNA酶的耗材（离心管、吸头等）。

扩增产物需妥善处理，防止环境污染。

性能参数

灵敏度：可检测低至10¹拷贝/μL的靶标。

特异性：不与其它微生物DNA/RNA发生交叉反应。

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