支原体通用染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

支原体通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

本试剂盒基于荧光定量PCR技术，针对支原体16S rRNA基因高度保守区域设计特异性引物及荧光染料。通过实时监测PCR扩增过程中双链DNA与染料的结合荧光信号，实现对支原体DNA的定量检测，适用于临床或实验室样本的病原学诊断。

试剂组成

MYCO-U反应液：500μL×2管

酶液：50μL×1管

阳性质控品：50μL×1管（含支原体特异性片段）

阴性质控品：250μL×1管（无核酸酶水）

注：不同批号组分不可混用。

储存条件及有效期

储存：-20℃±5℃避光保存，运输需冷链。

稳定性：反复冻融≤5次，有效期12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括但不限于：

ABI 7500

安捷伦 MX3000P/3005P

Roche LightCycler

Bio-Rad CFX系列

Eppendorf Mastercycler ep realplex

样本要求

可检样本类型：

细胞培养上清液

血清、唾液、尿液、鼻腔分泌物等体液

其他无菌采集液体样本

样本处理与保存：

短期（24小时内）：2~8℃保存。

长期：-70℃以下保存，冻融≤3次。

操作流程

核酸提取：按标准方法提取样本DNA。

反应体系配制：按比例混合反应液、酶液及模板DNA。

PCR扩增：

预变性：95℃ 5分钟

循环参数：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）

结果判读：通过CT值及扩增曲线分析，阳性质控CT值≤35且阴性无扩增时结果有效。

性能参数

灵敏度：可检测低至10 copies/μL的支原体DNA。

特异性：对常见细菌、真菌无交叉反应。

检测时间：约1.5小时（含扩增与数据分析）。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，避免污染。

试剂解冻后需彻底混匀并短暂离心。

建议每批次实验同步运行阴阳性质控。

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