生殖支原体染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

生殖支原体染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

定性及定量检测生殖支原体（Mycoplasma genitalium）核酸，适用于泌尿生殖道分泌物样本（如男性尿道拭子、女性宫颈拭子），辅助诊断相关感染。

产品组成

PCR反应液：含缓冲体系、dNTPs、荧光染料等。

DNA提取液：用于样本核酸提取。

阳性对照：无传染性的生殖支原体DNA片段（浓度1×10^8拷贝/μL）。

阴性质控品：确保检测特异性。

耐热DNA聚合酶（Taq酶）：确保扩增效率。

规格：50次/盒（20μL反应体系）。

性能参数

检测限：最低检出浓度为1×10^3基因拷贝/mL。

线性范围：10^2–10^7拷贝/μL（覆盖5个数量级）。

特异性：与解脲支原体、人乳头瘤病毒等无交叉反应。

内标质控：全程监控，减少假阴性风险。

样本要求

样本类型：尿道分泌物、宫颈拭子等。

采集与保存：

室温保存≤8小时，2–8℃≤72小时，-20℃可保存6个月（避免反复冻融）。

细菌污染样本需拒检。

运输条件：室温运输。

操作步骤

1. 标准曲线制备（以10^2–10^7拷贝/μL为例）

稀释阳性对照：

标记6管，分别加入45μL稀释液。

依次梯度稀释（10倍递减），获得10^7–10^2拷贝/μL的标准品。

每步更换枪头，避免交叉污染。

2. PCR反应体系配制

每反应孔加入：

5μL模板DNA

10μL PCR反应液

0.5μL Taq酶

4.5μL无核酸酶水

3. 扩增程序

预变性：95℃ 5分钟

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环）

荧光信号采集：60℃延伸阶段。

结果判读

定量分析：根据标准曲线计算样本中生殖支原体DNA拷贝数。

定性判定：Ct值≤38且扩增曲线呈“S”形为阳性。

注意事项

操作需在独立洁净区域进行，防止污染。

试剂开封后需分装保存，避免反复冻融。

推荐搭配自动化核酸提取系统（如天隆系统）以提高准确性。

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