牛皮蝇蛆染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术，通过嵌合双链DNA的SYBR Green染料实时监测扩增产物。随着PCR循环进行，染料与扩增产物结合后荧光信号增强，通过检测荧光强度变化实现对目标RNA/DNA的定量分析。

产品特点

高灵敏度：优化的引物设计可特异性扩增牛皮蝇蛆（Hypoderma bovis）保守序列，避免与其他病原体交叉反应。

反转录高效性：采用进口M-MLV反转录酶，可生成长链cDNA，保留完整基因信息。

操作便捷：预混缓冲液与酶体系，用户仅需提供RNA模板即可完成反转录及PCR扩增。

质量控制：含RNase抑制剂，降低外源污染风险；提供阳性对照以排除假阴性。

试剂盒组成

| 成分 | 规格/含量 |

| RT-PCR缓冲液 | 500 μL |

| M-MLV反转录酶 | 100 μL |

| SYBR Green PCR Mix | 1 mL |

| 牛皮蝇蛆特异性引物 | 100 μL |

| 阳性对照（cDNA） | 50 μL |

| RNase-free水 | 1 mL |

实验流程

RNA提取：使用无RNase污染的试剂提取样品RNA。

反转录：20 μL体系（含RNA模板、缓冲液、M-MLV酶），42℃反应15分钟。

qPCR扩增：50 μL体系（含cDNA、SYBR Green Mix、引物），按以下程序运行：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40次）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）

数据分析：通过标准曲线或Ct值计算模板初始浓度。

注意事项

避免污染：操作时需使用无RNase/DNase耗材，分区处理样本。

质量控制：阳性对照需出现预期扩增曲线，阴性对照无信号。

重复实验：若样本无扩增，建议稀释后重复以排除抑制剂干扰。

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