马鼻肺炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于马鼻肺炎病毒（Equine Rhinopneumonitis Virus）核酸的定性与定量检测。适用于科研用途，不可用于临床诊断。

产品特点

即开即用：用户仅需提供病毒DNA模板，操作便捷。

高特异性：基于马鼻肺炎病毒保守序列设计引物，与其他病原体无交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应。

宽线性范围：定量检测时覆盖至少5个数量级（如10²~10⁷拷贝/μL）。

防污染设计：一管式闭管检测，减少气溶胶污染风险。

规格与成分

2×qPCR MagicMix（500 μL/管，棕色管）

荧光PCR专用模板稀释液（1 mL/管，黄盖）

马鼻肺炎病毒PCR引物混合物（100 μL/管，白盖）

阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL，50 μL/管，红盖）

使用手册（1份）

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

自备试剂

DNA模板（需用户自行提取）。

10×ROX荧光校正染料（根据PCR仪器型号选择添加）。

使用方法

1. 阳性对照稀释（示例：10²~10⁷拷贝/μL梯度）

注意事项：稀释操作需在独立区域进行，避免污染。

步骤：

标记6管稀释液（编号7~2），每管加45 μL模板稀释液。

取5 μL阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得10⁷拷贝/μL梯度，依次稀释至10²拷贝/μL。

2. PCR反应体系（20 μL/反应）

按比例混合2×qPCR MagicMix、引物混合物、模板DNA及ROX（若需）。

推荐程序：预变性95℃ 3分钟；40循环（95℃ 15秒，60℃ 30秒，荧光采集）。

3. 结果分析

定量检测：根据标准曲线计算模板拷贝数。

电泳验证：取5~10 μL产物进行1.5%~2%琼脂糖凝胶电泳，预期扩增片段约200 bp。

质控要求：阴性对照无扩增，阳性对照Ct值≤35，否则实验无效。

注意事项

实验需设置阴性对照（水）和阳性对照（试剂盒提供）。

若阴性对照出现扩增，表明环境污染，需终止实验并排查污染源。

不同机型可能需调整ROX浓度，具体参考仪器说明书。

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