嵴病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品RNA模板，试剂盒预混优化引物、探针及反应体系。

高灵敏度：引物针对嵴病毒高度保守区设计，检测下限可达10^2拷贝/μL。

内控设计：提供无传染性RNA片段作为阳性对照，避免假阴性结果。

高特异性：引物经严格验证，不与相近病原体核酸发生交叉反应。

宽动态范围：定量检测线性范围覆盖5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL）。

适用范围：科研用途，适用于嵴病毒RNA的定性及定量检测。

操作步骤

标准曲线制备（以10^2–10^7拷贝/μL梯度为例）

注意事项：

操作需在独立洁净区域进行，避免气溶胶污染。

使用带滤芯枪头，防止交叉污染。

步骤：

标记6支离心管为7、6、5、4、3、2。

每管加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液。

取5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL，试剂盒提供）加入7号管，震荡混匀，得到1×10^7拷贝/μL的标准品。依次10倍稀释至2号管（10^2拷贝/μL）。

稀释后标准品置于冰上备用。

PCR反应体系配制

每反应20 μL体系包含：预混PCR缓冲液、引物探针混合液、RNA模板（或标准品/阴性对照）。

建议设置复孔以确保数据可靠性。

荧光定量PCR程序

逆转录：50°C 15分钟（可选，根据RNA模板需求）。

预变性：95°C 3分钟。

扩增循环（40次）：95°C 15秒 → 60°C 30秒（采集荧光信号）。

注意事项

储存条件：-20°C避光保存，避免反复冻融。

生物安全：阳性对照为灭活核酸片段，但仍需按生物安全二级实验室标准操作。

数据判读：定量结果需结合标准曲线分析，Ct值＞35建议重复检测。

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