副鸡禽杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于检测副鸡禽杆菌（Avibacterium paragallinarum）的核酸，适用于科研实验（不可用于临床诊断）。其特点包括高灵敏度（可检测低至几百拷贝/反应）、特异性强（引物针对保守序列设计，无交叉反应），且采用一管式封闭检测，避免污染。

规格与成分

2×qPCR MagicMix：500 μL（棕色管，含缓冲液、dNTPs、热启动DNA聚合酶等）

荧光PCR专用模板稀释液：1 mL（黄盖）

副鸡禽杆菌PCR引物混合物：100 μL（白盖，含特异性引物及荧光染料）

阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL）：50 μL（红盖，为副鸡禽杆菌DNA片段）

使用手册：1份

包装规格：50次/盒（20 μL反应体系）。

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

自备试剂

DNA模板（需用户自行提取）。

10×ROX校正染料（根据PCR仪器型号选择是否添加）。

使用方法

1. 阳性对照稀释（以10²–10⁷ 拷贝/μL梯度为例）

注意：操作需在独立区域进行，避免污染。

标记6支离心管（7–2号），每管加45 μL模板稀释液。

取5 μL阳性对照（10⁸ 拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到10⁷ 拷贝/μL标准品。

依次梯度稀释至2号管（10² 拷贝/μL），每次更换枪头。

2. PCR反应体系配置

每20 μL反应体系包含：

10 μL 2×qPCR MagicMix

2 μL引物混合物

2 μL模板DNA（或稀释后的标准品）

6 μL无核酸酶水

3. 荧光定量PCR程序

预变性：95℃ 3分钟

扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）

注意事项

实验需在符合生物安全标准的实验室进行。

避免反复冻融试剂，分装后使用。

阳性对照为DNA片段，不含活菌，无需生物安全顾虑。

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