中间普雷沃菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于荧光定量PCR技术，专为检测中间普雷沃菌（Prevotella intermedia）设计，适用于科研用途。采用染料法（如SYBR Green）检测扩增产物，具有高灵敏度和特异性，可同时实现定性和定量分析。

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，预混试剂含PCR所需全部组分（包括引物、dNTPs、缓冲液及热启动DNA聚合酶）。

高特异性：引物针对中间普雷沃菌保守序列设计，无交叉反应。

内置对照：提供阳性对照，便于排除假阴性结果。

兼容性强：PCR产物可直接上样电泳（含上样染料），支持20-50μL反应体系。

适用范围：线性定量范围达5个数量级，适用于环境或临床样本检测。

规格与成分

包装规格：50次反应（20μL/次或40μL/次，视型号而定）。

主要组分：

PCR预混液（含荧光染料）

中间普雷沃菌特异性引物混合液

阳性对照DNA

超纯水（无核酸酶）

实验步骤

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒提取样本DNA，建议浓度50ng-1μg/μL。

2. 反应体系配制（以20μL为例）

| 组分 | 体积（μL） |

| PCR预混液 | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| DNA模板 | 1-2 |

| 超纯水 | 补足至20 |

3. PCR扩增程序

预变性：95℃, 3-5分钟；

循环阶段（35-40循环）：

变性：95℃, 30秒

退火：58℃, 30秒（温度需根据引物优化）

延伸：72℃, 30秒

终延伸：72℃, 5分钟。

4. 数据分析

使用荧光定量PCR仪采集信号，通过阈值循环数（Ct值）计算模板浓度。

注意事项

避免污染：分区操作（样本制备、反应配制、扩增区），使用带滤芯枪头。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（无模板）和阳性对照。

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

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