小鼠氨基端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒 新品

小鼠氨基端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒

产品简介:

检测原理

采用双抗体夹心法酶联免疫吸附检测技术（ELISA）。

预先包被抗小鼠NT-proBNP抗体的酶标孔中加入标准品和样本，温育后加入生物素标记的抗NT-proBNP抗体，再与HRP标记的链霉亲和素结合，形成免疫复合物。经温育和洗涤后，加入显色底物TMB，产生颜色变化，最后在450 nm处测定吸光度（OD）值，样本中的NT-proBNP浓度与OD值成正比，通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

预包被抗体的96孔板：8×12条。

标准品：1支。

标准品/样品稀释液：10ml（48T）或15ml（96T）。

生物素化检测抗体：60μl（48T）或120μl（96T）。

生物素化抗体稀释液：6ml（48T）或12ml（96T）。

SABC复合物：6ml（48T）或12ml（96T）。

TMB显色液（A/B）：各3ml（48T）或各6ml（96T）。

终止液：6ml（48T）或12ml（96T）。

20×浓缩洗涤液：30ml（48T）或60ml（96T）。

封板胶纸：2张（48T）或4张（96T）。

产品说明书：1份。

检测范围与灵敏度

检测范围：15.63-1000 pg/mL。

灵敏度：9.38 pg/mL。

特异性

可检测样本中的小鼠NT-proBNP，且与其类似物无明显交叉反应。

适用样本

血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液及其他相关生物体液。

操作步骤

加样：空白孔加入50μl标准品/样品稀释液，其余孔加入标准品或待测样品50μl，混匀后置37℃，40分钟。

洗板：用1×洗涤液充分洗涤4-6次，每孔加入1×洗液350μl，每次震荡/浸泡1-2分钟，向滤纸上印干。

加生物素化抗体：空白孔加入100μl生物素化抗体稀释液，其余孔加入1×的生物素化抗体工作液100μl，混匀后置37℃，30分钟。

洗板：同上。

加SABC复合物：每孔加入SABC复合物工作液100μl，混匀后置37℃，20分钟。

洗板：同上。

显色：每孔加入提前配置好的TMB混合液100μl，混匀后置37℃暗处反应10-20分钟。

终止：每孔加入100μl终止液，混匀，30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

注意事项

试剂准备：所有试剂需恢复至室温，避免反复冻融。

样本处理：样本应尽早检测，如需保存，应分装后冷冻，避免反复冻融。

洗涤过程：洗涤不充分会导致精确度误差及OD值错误地升高。

结果计算：所有OD值建议减除空白值后再行计算，如空白OD低于0.1，也可以直接计算。

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ELISA试剂盒的主要优点：

ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：

灵敏度高（抓得准）：

它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。

特异性强（瞄得准）：

基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。

操作简便且快速：

相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。

高通量与适用性广：

它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。

安全稳定：

不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。