CY5 Luciferase mRNA(N1-Me-pUTP)

核心结构与修饰特点：该 mRNA 通过体外转录合成，5' 端带有 Cap 1 帽子结构（增强稳定性与翻译起始效率），3' 端含有 poly (A) 尾（延长半衰期，通常长度为 100-200 个腺苷酸）。关键特征在于双模态标记与核苷酸修饰：CY5 通过替换部分尿苷三磷酸（UTP）实现对 mRNA 的近红外荧光标记，可通过荧光显微镜、流式细胞术或小动物成像系统检测；Luciferase 为报告基因，表达的萤火虫荧光素酶在 ATP 存在下催化 D - 荧光素氧化，在 560 nm 波长处产生化学发光信号，可通过微孔板读板仪或活体成像系统定量检测。N1-Me-pUTP 修饰是将天然 UTP 完全替换为 N1 - 甲基假尿苷三磷酸，此修饰可显著降低 mRNA 的免疫原性（避免激活 TLR3/7/8 等模式识别受体），同时提高翻译效率与 mRNA 稳定性，减少 dsRNA 杂质产生。

关键性能参数：纯度通常≥98%（IP-RP-HPLC 检测），内毒素含量低（一般 < 10 EU/mg）以减少对细胞的非特异性刺激。mRNA 长度约 1650 nt（对应萤火虫荧光素酶编码序列），浓度常见为 1 mg/ml，包装规格多为 100 μg、500 μg、1 mg 等，满足不同实验需求。稳定性方面，在 - 80℃避光保存条件下可长期稳定（通常≥12 个月），避免反复冻融影响活性，建议分装保存。dsRNA 含量极低（通常 < 0.1%），进一步降低免疫原性风险。

实验应用优势：双模态标记实现 “mRNA 定位与分布”（CY5 荧光）和 “蛋白表达定量”（Luciferase 化学发光）的同步监测，可区分 mRNA 摄取与翻译两个关键步骤，为递送系统优化提供更精准的数据支撑。Luciferase 化学发光信号具有高灵敏度（检测限可达 pg 级蛋白）、宽动态范围（可达 10⁶倍）和低背景的特点，适合定量分析。N1-Me-pUTP 修饰降低免疫原性，使实验结果更接近生理状态，减少假阳性信号。无需基因整合即可表达报告蛋白，避免了基因编辑技术可能带来的基因组不稳定性风险，实验周期短、操作简便，适用于高通量筛选实验。

使用注意事项：该产品仅用于科研用途，不可用于人体或动物临床应用。使用时需严格遵循无菌操作规范，转染后可通过近红外成像系统追踪 CY5 标记的 mRNA 分布，通过加入 D - 荧光素底物后检测化学发光信号评估翻译效率。建议转染后 6-48 小时检测信号，具体时间点根据细胞类型与实验目的调整。避免与 RNase 接触，所有实验耗材需无 RNase 处理，以保证 mRNA 完整性。