人钙网蛋白(CRT)ELISA试剂盒

1. 核心产品定位：

检测靶标：人钙网蛋白（46kDa内质网伴侣蛋白），免疫原性细胞死亡（ICD）关键标志物

技术突破：

同步检测内质网型（ER-CRT）和膜转位型（Surface-CRT）

特异性识别氧化态（免疫原性形式）

临床价值： ? 肿瘤免疫治疗响应预测 ? 自身免疫疾病（如SLE）诊断标志物

多模态检测系统

核心组分  技术规格  创新设计

捕获抗体  抗CRT单抗（克隆3H3）  识别KDEL内质网定位信号

检测抗体  量子点-链霉亲和素（QD605）  红光通道避免自发荧光干扰

标准品  重组人CRT（含/不含氧化修饰）  NCI标准品溯源

反应板  内质网膜模拟涂层板  增强ER型捕获

检测模式  双波长检测（450nm/605nm）  氧化态占比分析

动态检测机制

graph TB

A[样本CRT] --> B{亚型选择}

B -->|ER型| C(KDEL信号捕获)

B -->|膜型| D(磷脂酰丝氨酸结合)

C & D --> E(QD605标记)

E --> F[荧光偏振检测]

前沿应用场景

肿瘤免疫：

化疗/放疗诱导的ICD监测

PD-1抗体治疗疗效预测

自身免疫病：

系统性红斑狼疮（SLE）活动度评估

抗CRT抗体水平关联分析

心血管疾病：

动脉粥样硬化斑块稳定性评估

心肌缺血再灌注损伤研究

超敏性能参数

指标  本试剂盒  常规ELISA

灵敏度  5 pg/mL  50 pg/mL

检测范围  10-5000 pg/mL  100-10000 pg/mL

亚型区分  ER型/膜型同步检测  仅总CRT

氧化态检测  特异性>95%  无法区分

检测时间  2.5小时  4小时

智能实验方案

样本处理规范：

细胞样本：0.02% Digitonin温和裂解（保留膜型CRT）

血清样本：添加5mM DTT（防止氧化假阳性）

标准曲线算法：

python

四参数logistic拟合（加权最小二乘法）

def 4PL(x, A, B, C, D):

return D + (A-D)/(1 + (x/C)**B)

质量控制：

每板设置氧化态/还原态对照

板间CV<8%（n=20）

公司正在出售的产品：

常见问题与避坑指南：

环节   风险点   避坑建议

试剂使用   混用   严禁混用不同品牌或不同批号的试剂盒组分（如A品牌的包被板+B品牌的酶标二抗），这会导致反应体系崩溃。

终止反应   顺序   加入终止液后，溶液由蓝变黄。此时应尽快读数，因为颜色可能会随时间轻微变化。

保存   剩余板条   未用完的酶标板条，需立即密封，放入自封袋中并加干燥剂，保存于 2-8℃，避免受潮和反复冻融。

环境   污染   避免试剂接触漂白剂或含漂白剂的物质，它们会破坏酶的活性，导致实验失败。

建议： 

在购买前，务必查看说明书中的“交叉反应”列表和“样本类型”说明。如果说明书宣称特异性极高（如CR0.1%），

但在你的实际样本中出现了大量假阳性，那可能需要优化洗涤步骤，或者考虑更换抗体特异性更强的试剂盒。