人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)ELISA试剂盒

人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)ELISA试剂盒

产品简介:

人单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）ELISA试剂盒用于定量检测人体样本（如血清、血浆、细胞培养上清液等）中的MCP-1水平。MCP-1，也称为CCL2，是一种重要的趋化因子，主要参与调控单核细胞、记忆T细胞和自然杀伤细胞的迁移，在炎症反应、免疫调节及多种疾病（如动脉粥样硬化、类风湿关节炎、糖尿病肾病等）的发生发展中发挥关键作用1

检测原理

双抗体夹心法ELISA：微孔板预包被抗MCP-1抗体，样本中的MCP-1与生物素化的检测抗体结合，再与HRP标记的链霉亲和素反应，加入TMB底物后显色，颜色深浅与MCP-1浓度呈正相关，酶标仪在450 nm波长处读数。

主要组成

预包被酶标板（96/48孔）

MCP-1标准品（多个浓度梯度）

生物素化检测抗体

HRP标记链霉亲和素

底物溶液（TMB）、终止液（硫酸）

洗涤缓冲液、样本稀释液、封板膜等辅助试剂

检测流程

加样：标准品/样本+生物素化检测抗体+HRP标记链霉亲和素

洗涤：每孔加满洗涤液，重复5次

显色：加入底物溶液，避光反应10-15分钟

终止：加入终止液

读数：酶标仪450 nm波长测定OD值

性能指标

检测范围：通常为62.5-4000 pg/mL（具体以说明书为准）

灵敏度：最小可检测剂量小于37.5 pg/mL

特异性：仅与人类MCP-1反应，不与其他趋化因子显著交叉反应

重复性：板内变异系数≤10%，板间变异系数≤15%

临床与研究意义

炎症性疾病研究：MCP-1在类风湿关节炎、炎症性肠病等慢性炎症性疾病中显著升高，可作为评估疾病活动度和治疗效果的生物标志物。

心血管疾病研究：MCP-1参与动脉粥样硬化斑块的形成与发展，检测其水平有助于评估心血管疾病风险及病情进展。

肿瘤研究：MCP-1在肿瘤微环境中促进肿瘤相关巨噬细胞浸润，其表达水平与肿瘤侵袭、转移及预后相关。

肾脏疾病研究：MCP-1在糖尿病肾病、IgA肾病等肾脏疾病中表达上调，可作为评估肾损伤和疾病进展的潜在标志物

样本要求

血清/血浆：避免溶血和反复冻融。

其他样本：如细胞培养上清液、组织匀浆，需经适当处理和稀释。

注意事项

试剂盒需2-8℃保存，有效期一般为6个月。

实验前平衡至室温，严格按照说明书操作。

建议设空白对照、标准曲线和样本复孔，确保结果准确可靠。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。