萨比亚病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

萨比亚病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：预混优化引物、探针及反应体系，用户仅需提供病毒RNA模板。

高灵敏度：检测下限可达几百拷贝/反应，适用于低浓度样本。

高特异性：针对萨比亚病毒保守序列设计引物，无交叉反应。

双重功能：支持定性和定量检测，定量线性范围≥5个数量级。

防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。

内置对照：提供阳性质控品（DNA片段）和阴性质控品，便于结果判读。

试剂盒组成

| 组分名称 | 规格 |

| 萨比亚病毒扩增液 | 100μL ×1管 |

| 萨比亚病毒反应液 | 900μL ×1管 |

| 阳性质控品（非活体） | 50μL ×1管 |

| 阴性质控品 | 50μL ×1管 |

| 说明书 | 1份 |

操作步骤

1. 样本处理

提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

2. 阳性对照稀释（示例）

按10倍梯度稀释阳性质控品（10^2~10^7拷贝/μL），独立操作以避免污染。

3. PCR反应体系配制

每20μL反应体系包含：

10μL反应液

2μL扩增液

2μL模板RNA（或对照品）

6μL无核酸酶水

4. 上机检测

按以下程序运行荧光定量PCR仪：

逆转录：50℃ 10分钟

预变性：95℃ 3分钟

扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光）

结果分析

定性：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。

定量：根据标准曲线计算拷贝数。

注意事项

实验分区操作，避免气溶胶污染。

阳性质控品为DNA片段，不可用于病毒培养。

试剂解冻后需彻底混匀，避免反复冻融。

废弃物料需按生物安全规范处理。

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