肠道病毒71型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品基本信息

产品名称：肠道病毒71型（EV71）核酸检测试剂盒（荧光定量RT-PCR法）

检测方法：实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）

应用范围：定性检测粪便、咽拭子、疱疹液等临床样本中的EV71核酸。

规格：常见规格包括24人份/盒、32T/盒或50T/盒（具体以型号为准）。

检测原理

采用荧光探针法（如FAM标记的VP1基因探针），通过特异性引物和探针靶向EV71 RNA，结合逆转录和扩增步骤，实时监测荧光信号，实现核酸的定性检测。内参（如HEX标记）用于监控实验全程，避免假阴性。

样本处理要求

咽拭子/疱疹液：置于病毒保存液（如UTM）中震荡洗脱，离心取上清。

粪便样本：制备10%悬液，过滤去除颗粒物后取上清。

核酸提取：推荐磁珠法或Trizol法（如Qiagen RNeasy Mini Kit），需严格避免RNA酶污染。

PCR扩增程序

逆转录：50℃ 15分钟。

预变性：95℃ 3分钟。

扩增循环：95℃ 15秒 → 60℃ 45秒，共45个循环（荧光信号采集于60℃阶段）。

结果判读标准

阳性：FAM通道Ct值≤35，且内参Ct值≤30。

可疑：35<Ct<38，建议复测或测序验证。

阴性：无Ct值或Ct≥38。

性能参数

灵敏度：≤100 copies/反应。

特异性：不与柯萨奇病毒A16（CV-A16）交叉反应。

检出限：95%检出率（10³ copies/mL）。

重复性：批内/批间Ct值差异≤1.5。

储存及有效期

储存条件：-20±5℃避光保存。

有效期：通常为9个月（以具体产品标注为准）。

注意事项

实验需在符合生物安全等级的实验室进行。

试剂盒组分需避免反复冻融，使用前充分混匀。

临床诊断需结合其他检测指标及临床症状综合判断。

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