胡萝卜源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，操作流程简化。

高特异性：引物基于胡萝卜高度保守序列设计，避免与其他微生物DNA交叉反应。

内置对照：提供阳性对照（非活体DNA片段），便于区分假阴性结果。

兼容性：PCR预混液含上样染料，扩增产物可直接用于电泳分析。

试剂盒组成

| 成分 | 规格/包装 | 备注 |

| 2×qPCR Magic Mix | 500 μL（棕色管） | 含染料、dNTPs及热启动酶 |

| 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 用于阳性对照稀释 |

| qPCR引物混合液 | 100 μL（白盖） | 特异性引物及探针 |

| 阳性对照（1×10^8拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） | 非活体DNA片段 |

| 阴性对照 | 50 μL（透明管） | 无核酸酶水 |

| 说明书 | 1份 | 含操作流程及数据分析方法 |

运输与保存

运输条件：低温干冰运输。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。避免反复冻融。

实验操作步骤

1. 阳性对照稀释（示例：10E2-10E7拷贝/μL梯度）

在独立洁净区域操作，避免污染。

标记6管稀释液，依次加入45 μL荧光PCR模板稀释液。

从高浓度（10E8拷贝/μL）开始梯度稀释，每步取5 μL至下一管，涡旋混匀后冰上保存。

2. PCR反应体系配置

按说明书比例混合试剂、模板DNA及引物。

建议反应程序：预变性（95℃, 5 min）→ 循环扩增（95℃ 15 s, 60℃ 30 s, 40循环）。

3. 结果分析参数设定

基线（Baseline）：选择指数扩增前稳定信号区间（建议循环数6~15）。

阈值（Threshold）：设定高于阴性对照扩增曲线最高点。

质控标准

阴性对照：Ct值≥40或无扩增曲线。

阳性对照：需显示典型S型扩增曲线，Ct值在预期范围内。

注意事项

避免反复冻融试剂，分装后保存。

实验废弃物需按生物安全规范处理。

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