人白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒

产品简介：

人白血病抑制因子（LIF）ELISA试剂盒用于定量检测人体样本（如血清、血浆、细胞培养上清等）中的LIF蛋白水平。LIF是一种多功能细胞因子，属于白细胞介素-6（IL-6）家族，参与调控细胞增殖、分化、胚胎发育及炎症反应等多种生物学过程

检测原理

双抗体夹心法ELISA：微孔板预包被抗LIF抗体，样本中的LIF与生物素化的检测抗体结合，再与HRP标记的链霉亲和素反应，加入TMB底物后显色，颜色深浅与LIF浓度呈正相关，酶标仪在450 nm波长处读数。

主要组成

预包被酶标板（96/48孔）

LIF标准品（多个浓度梯度）

生物素化检测抗体

HRP标记链霉亲和素

底物溶液（TMB）、终止液（硫酸）

洗涤缓冲液、样本稀释液、封板膜等辅助试剂

检测流程

加样：标准品/样本+生物素化检测抗体+HRP标记链霉亲和素

洗涤：每孔加满洗涤液，重复5次

显色：加入底物溶液，避光反应10-15分钟

终止：加入终止液

读数：酶标仪450 nm波长测定OD值

性能指标

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL（具体以说明书为准） 78

灵敏度：最小可检测浓度小于4 pg/mL

特异性：仅与人类LIF反应，不与其他IL-6家族成员显著交叉反应

重复性：板内变异系数≤10%，板间变异系数≤15%

临床与研究意义

血液系统疾病研究：LIF通过JAK-STAT信号通路调控白血病干细胞的自我更新，在急性髓系白血病（AML）等疾病中具有潜在的诊断和预后价值

干细胞研究：LIF是维持胚胎干细胞多能性的关键因子，其检测有助于研究干细胞的增殖与分化机制。

炎症与免疫研究：LIF参与调控炎症反应和免疫细胞活性，在自身免疫性疾病、炎症性肠病等研究中具有重要意义

样本要求

血清/血浆：避免溶血和反复冻融。

其他样本：如细胞培养上清、组织匀浆，需经适当处理和稀释。

注意事项

试剂盒需2-8℃保存，有效期一般为6个月。

实验前平衡至室温，严格按照说明书操作。

建议设空白对照、标准曲线和样本复孔，确保结果准确可靠。

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常见问题与避坑指南：

环节   风险点   避坑建议

试剂使用   混用   严禁混用不同品牌或不同批号的试剂盒组分（如A品牌的包被板+B品牌的酶标二抗），这会导致反应体系崩溃。

终止反应   顺序   加入终止液后，溶液由蓝变黄。此时应尽快读数，因为颜色可能会随时间轻微变化。

保存   剩余板条   未用完的酶标板条，需立即密封，放入自封袋中并加干燥剂，保存于 2-8℃，避免受潮和反复冻融。

环境   污染   避免试剂接触漂白剂或含漂白剂的物质，它们会破坏酶的活性，导致实验失败。

建议： 

在购买前，务必查看说明书中的“交叉反应”列表和“样本类型”说明。如果说明书宣称特异性极高（如CR0.1%），

但在你的实际样本中出现了大量假阳性，那可能需要优化洗涤步骤，或者考虑更换抗体特异性更强的试剂盒。