羽扇豆源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于检测样品中羽扇豆源性成分。具有高灵敏性（最低检测限100拷贝/反应）、高特异性（引物针对保守区设计，避免交叉反应），适用于定性和定量分析，定量线性范围覆盖至少5个数量级。

试剂盒组成

| 名称 | 规格 | 包装特征 |

| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5 mL×1管 | 预混荧光染料 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL×1管 | 无色透明 |

| 超纯水 | 1 mL×1管 | 亮黄色盖 |

| 染料法qPCR引物混合液 | 100 μL×1管 | 白盖 |

| 阳性对照（1×10^7拷贝/μL）| 50 μL×1管 | 黄盖 |

| 使用手册 | 1份 | —— |

保存条件与有效期

保存温度：避光-20℃储存。

有效期：12个月。

操作步骤

1. 试剂准备（试剂准备区）

所有组分使用前需自然融化，混匀后短暂离心。

阳性对照稀释（以10^1-10^6拷贝/μL为例）：

标记6管离心管（6-1号），每管加45 μL模板稀释液。

6号管加5 μL阳性对照（1×10^7拷贝/μL），震荡1分钟，得1×10^6拷贝/μL标准品，冰上保存。

依次稀释至1号管，获得10倍梯度标准曲线样品。

2. 反应体系配制（PCR反应区）

按20 μL体系配制：

2×SYBR MasterMix 10 μL

引物混合液 2 μL

模板DNA 2 μL

超纯水补至20 μL。

避免气泡，盖紧管盖。

3. PCR扩增程序

预变性：95℃ 3分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，防止交叉污染。

防护措施：使用一次性吸头、手套及专用工作服，实验后以10%次氯酸或75%酒精消毒台面。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（超纯水替代模板）和阳性对照。

废弃物处理：所有试剂及耗材按《微生物生物医学实验室生物安全通则》处置。

性能参数

分析灵敏度：100拷贝/反应。

特异性：不与常见非目标生物DNA发生交叉反应。

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