鲑鱼源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光PCR技术，针对鲑鱼源性成分基因高度保守区域设计特异性引物。通过扩增目标核酸并监测荧光信号强度，实现定性（有无鲑鱼成分）和定量（拷贝数分析）检测。线性定量范围覆盖5个数量级，特异性强，可避免与其他物种DNA交叉反应。

试剂组成

鲑鱼源性成分扩增液：50μL×1管（含引物、SYBR Green染料等）

阳性对照：无传染性DNA片段（1×10^8拷贝/μL），用于标准曲线制备及质控。

荧光PCR专用模板稀释液：用于标准品梯度稀释（需独立操作以防污染）。

操作步骤

标准曲线制备（以10^2~10^7拷贝/μL梯度为例）：

标记离心管（2~7号），每管加入45μL稀释液。

取5μL阳性对照加入7号管（终浓度10^7拷贝/μL），依次稀释至2号管（10^2拷贝/μL）。

样本处理：待测样本DNA提取后与标准品同步上机检测。

PCR扩增：

反应体系：20μL（含扩增液、模板DNA）。

程序：预变性（95℃, 5min）→循环扩增（95℃ 10s, 60℃ 30s, 40次）→熔解曲线分析。

注意事项

防污染：标准品稀释需在独立区域操作，使用带滤芯枪头。

质控要求：每批次实验需包含阴性对照（无模板）及阳性对照。

数据判读：通过Ct值及熔解曲线峰型确认特异性扩增，定量结果需基于标准曲线。

储存与运输

保存温度：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月（生产日期见包装标签）。

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