人白介素9(IL-9)ELISA试剂盒

人白介素9(IL-9)ELISA试剂盒

产品简介:

是用于精准检测这一多功能细胞因子的专业工具。作为γc受体家族成员，IL-9在过敏性疾病、寄生虫免疫和血液系统肿瘤中发挥关键调控作用。以下为基于当前最新技术标准的全面解析（北京时间2025年9月18日15:57）。

技术原理与创新特性

高敏检测系统设计：

双表位识别：采用抗人IL-9单抗（克隆MH9A4）作为捕获抗体，结合生物素化检测抗体（克隆MH9B3）靶向C端α螺旋结构域

活性构象检测：通过特殊缓冲液稳定IL-9四螺旋束结构，避免检测过程中构象变化

抗干扰优化：添加IL-4受体阻断肽消除假阳性（特别适用于哮喘患者样本）

2025年技术升级：

新增电化学发光数字ELISA模式（灵敏度达0.01 pg/mL）

标准品溯源至WHO国际标准（NIBSC 16/102）

微孔板采用仿生纳米结构（批间差<3.2%）

试剂盒配置与关键参数

标准组件清单：

预包被96孔板（8×12可拆，充氮包装）

重组人IL-9标准品（6梯度：0.05-100 pg/mL，含NIST证书）

检测系统：

钌标记链霉亲和素（4℃避光稳定12个月）

TPA电化学发光底物

专用支气管肺泡灌洗液（BALF）处理液

性能指标：

参数  规格  生物学意义

检测范围  0.05-100 pg/mL  覆盖生理和病理浓度

灵敏度  0.015 pg/mL  可检测Th9细胞微量分泌

精密度  板内CV<3.5%，板间CV<6%  满足GLP要求

特异性  与IL-7交叉反应<0.001%  确保检测准确性

实验操作标准化流程

样本处理关键点：

呼吸道样本：BALF需经0.45μm滤膜过滤

稳定性数据：

4℃保存≤24小时（需添加蛋白酶抑制剂）

-80℃可保存2年（避免反复冻融）

特殊处理：

寄生虫感染样本需1:5预稀释

肿瘤组织需液氮速冻后研磨

优化操作步骤：

样本预处理：含1%BSA的PBS封闭非特异性结合

加样策略：采用中心放射加样顺序

关键孵育：37℃微孔板振荡器（600rpm）90分钟

信号读取：MSD电化学发光仪（积分时间500ms）

临床应用与科研价值

疾病诊断阈值：

哮喘活动期：BALF中>15 pg/mL提示嗜酸性粒细胞浸润

霍奇金淋巴瘤：血清>20 pg/mL与疾病进展正相关

寄生虫感染：蠕虫感染患者可达50-200 pg/mL

2025年研究突破：

发现IL-9通过JAK1-STAT5/PU.1通路调控肥大细胞活化

抗IL-9纳米抗体（o-IL9）进入II期临床试验

单细胞测序揭示肺纤维化中IL-9+ ILC2细胞亚群

质量控制与问题处理

质控标准：

标准曲线要求：5参数拟合R2≥0.997

必检参数：

空白信号<800 RLU

质控品回收率94-106%

故障排除指南：

异常现象  可能原因  解决方案

前带效应  抗原过量  进行1:10-1:100梯度稀释

信号漂移  温度不均  使用带PID控制的孵育箱

孔间差异  板条变形  检查运输条件，更换新板

公司正在出售的产品：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。