禽痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

禽痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

用于禽痘病毒（Avianpoxvirus, APV）的快速、灵敏定性及定量检测，适用于科研领域。

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，试剂盒包含预混PCR反应液，简化操作流程。

高特异性：引物针对禽痘病毒基因组保守区设计，避免与其他病毒或宿主DNA交叉反应。

灵敏度高：检测下限可达10^2拷贝/μL，线性范围覆盖5个数量级（10^2~10^7拷贝/μL）。

质量控制：提供阳性对照（1×10^8拷贝/μL），便于区分假阴性结果。

兼容性：适配多数核酸提取试剂盒，支持20–50μL反应体系（50次检测）。

规格及成分

| 成分编号 | 名称及规格 |

| 1 | PCR预混液（含荧光染料，40μL/次×50次） |

| 2 | 禽痘病毒特异性引物混合液（100μL） |

| 3 | 阳性对照（1×10^8拷贝/μL） |

| 4 | DEPC-H2O（1mL） |

操作步骤

1. DNA提取

使用兼容的核酸提取试剂盒制备样本DNA，建议浓度≥50ng/μL。

2. 标准曲线制备（定量检测适用）

将阳性对照按10倍梯度稀释（10^7~10^2拷贝/μL），每个梯度设3个复孔。

操作需在独立区域进行，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制

每20μL反应体系：10μL预混液 + 2μL引物混合液 + 2μL模板DNA + 6μL DEPC-H2O。

阴性对照：以DEPC-H2O替代模板DNA。

4. 荧光定量PCR程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 3min | 1 |

| 扩增 | 95℃ 10s → 60℃ 30s（采集荧光） | 40 |

| 溶解曲线分析 | 95℃ 15s → 60℃ 1min → 95℃ 15s | 1 |

结果判读

定性检测：Ct值≤35且溶解曲线为单一峰，判为阳性。

定量检测：根据标准曲线计算样本拷贝数。

注意事项

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

试剂保存于-20℃，避免反复冻融（有效期12个月）。

实验分区操作（样本制备区、PCR反应区），防止污染。

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