俄罗斯春夏脑炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

俄罗斯春夏脑炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量RT-PCR技术，专用于俄罗斯春夏脑炎病毒（Russian Spring-Summer Encephalitis Virus, RSSEV）核酸的快速、高灵敏度检测。适用于科研领域，不可用于临床诊断。

产品特点

高特异性：基于病毒保守序列设计引物，与相近病原体无交叉反应。

高灵敏度：检测限可达数百拷贝/反应。

操作简便：预混反应体系（一管式检测），减少操作污染风险。

即用型设计：用户仅需提供病毒RNA样本，无需额外配制主反应液。

规格与成分

规格：50次/盒（20μL反应体系/次）

主要成分：

2×qPCR预混液（含荧光染料）

俄罗斯春夏脑炎病毒特异性引物混合物

阳性对照（1×10^8拷贝/μL，非活体DNA片段）

荧光PCR专用模板稀释液

实验步骤

样本准备

RNA提取：使用商业RNA提取试剂盒从样本中提取病毒RNA。

阳性对照稀释（梯度制备）：

按10倍梯度稀释阳性对照（10^2–10^7拷贝/μL），独立操作以避免污染。

每稀释步骤需更换枪头，充分震荡混匀后冰浴备用。

PCR反应体系配制

在冰浴条件下按以下比例配制反应液（单次反应）：

2×qPCR预混液：10 μL

特异性引物混合物：2 μL

模板RNA或阳性对照：2 μL

无核酸酶水：补足至20 μL

短暂离心混匀，避免气泡。

扩增程序设置

预变性：95℃ 3分钟（激活酶活性）。

循环扩增（40循环）：

变性：95℃ 15秒

退火/延伸：60℃ 1分钟（采集荧光信号）

终延伸：72℃ 5分钟。

结果判读

通过荧光阈值（Ct值）定量分析，标准曲线由阳性对照梯度稀释生成。

无模板对照（NTC）应无扩增曲线，否则提示污染。

注意事项

分区操作：试剂配制、样本处理及扩增需在独立区域进行。

防护措施：穿戴实验服、手套，使用带滤芯枪头。

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

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