牛传染性鼻气管炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

牛传染性鼻气管炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒基于SYBR Green荧光染料法，通过实时荧光定量PCR技术定性检测牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）核酸，适用于临床样本（如鼻拭子、组织液等）的快速检测，为疾病诊断和流行病学监测提供依据。

检验原理

针对IBRV保守基因序列设计特异性引物，PCR扩增过程中SYBR Green染料与双链DNA结合释放荧光信号，通过实时监测荧光强度定量分析病毒核酸载量。

主要组成成分

PCR预混液（含SYBR Green染料、dNTPs、Taq酶等）

IBRV特异性引物混合液

阳性对照（含IBRV靶基因片段，1×10^8 copies/μL）

阴性对照（灭菌纯水）

核酸释放剂（可选，用于样本前处理）

包装规格：25T/盒、50T/盒

储存条件及有效期

-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 7500/QuantStudio系列

Bio-Rad CFX系列

Roche LightCycler 480

杭州博日LineGene系列等

样本要求

样本类型：鼻拭子、组织匀浆液、支气管肺泡灌洗液等。

保存条件：

短期（≤72小时）：2~8℃冷藏；

长期：-20℃以下冻存，避免反复冻融。

检验步骤

样本处理：

液体样本离心取上清，组织样本需匀浆后提取DNA。

反应体系配制（以25μL体系为例）：

PCR预混液：12.5μL

引物混合液：2μL

模板DNA：5μL

超纯水补至25μL。

PCR程序：

预变性：95℃ 5分钟；

扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）。

结果判读

阳性：扩增曲线呈S型，Ct值≤35；

阴性：无扩增曲线或Ct值＞38。

注意事项

实验分区操作，避免污染；

试剂解冻后需涡旋混匀并瞬时离心；

阳性对照需与待测样本分开存放。

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