牛巨细胞病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

牛巨细胞病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于牛巨细胞病毒核酸的定性或定量检测，适用于科研领域，不可用于临床诊断。

产品特点

即开即用：用户仅需提供病毒DNA模板，无需额外配制反应体系。

高特异性：引物针对牛巨细胞病毒保守序列设计，与其他病原体无交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应，线性范围覆盖至少5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

防污染设计：一管式封闭检测，避免扩增产物污染。

稳定对照：提供非活体DNA片段作为阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），确保结果可靠性。

规格与组分

2×qPCR MagicMix：500 μL/管（棕色管）

荧光PCR专用模板稀释液：1 mL/瓶（黄盖）

牛巨细胞病毒PCR引物混合物：100 μL/管（白盖）

阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）：50 μL/管（红盖）

使用手册：1份

保存与运输

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输方式：低温干冰运输。

自备试剂

DNA模板

10×ROX荧光校正染料（根据PCR仪器型号选择，详见说明书）。

使用方法

阳性对照稀释（以10²~10⁷拷贝/μL梯度为例）

注意事项：操作需在独立区域进行，避免污染试剂盒其他组分。

标记6支离心管为7至2号，每管加入45 μL模板稀释液。

取5 μL阳性原液（10⁸拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到10⁷拷贝/μL稀释液。

依次梯度稀释至2号管（10²拷贝/μL），每次更换枪头，冰上保存备用。

PCR反应体系（20 μL体系）

2×qPCR MagicMix：10 μL

引物混合物：2 μL

DNA模板：2 μL

ROX染料：0.4 μL（按仪器要求调整）

ddH₂O：补至20 μL

扩增程序

预变性：95℃ 3分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

溶解曲线分析：按仪器默认设置执行。

结果判读

定量分析：以标准曲线计算样本拷贝数；

定性分析：Ct值≤35判为阳性，＞35需重复检测。

注意事项

所有操作需符合分子生物学实验室规范，避免核酸污染。

阳性对照需单独存放，严禁与待测样本交叉使用耗材。

试剂解冻后需彻底混匀，避免反复冻融（建议分装保存）。

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