多瘤病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于多瘤病毒（Polyoma Virus, Py）的快速、高灵敏度检测。适用于科研用途，不可用于临床诊断。

产品特点

即开即用：用户仅需提供纯化的病毒DNA模板。

高特异性：引物针对多瘤病毒保守序列设计，避免交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达几百拷贝/反应。

防污染设计：一管式封闭检测，减少后续污染风险。

兼容性：与主流核酸提取试剂盒兼容。

规格及成分

试剂一：2×qPCR MagicMix（500 μL，棕色管）

试剂二：荧光PCR专用模板稀释液（1 mL，黄盖）

试剂三：多瘤病毒染料法PCR引物混合液（100 μL，白盖）

规格：50次/盒（20 μL反应体系）

保存条件

-20℃避光保存，保质期6个月。

操作步骤

1. DNA提取

使用自选方法或兼容的核酸提取试剂盒纯化样本DNA。

2. 标准曲线制备（可选）

（需在独立区域操作，避免污染）

标记离心管（7至2号），依次加入45 μL DEPC-H2O。

在7号管中加入5 μL阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），震荡混匀，得到1×10⁷拷贝/μL的标准品，冰上保存。

按梯度稀释至1×10⁶拷贝/μL（6号管），重复至完成系列稀释。

3. PCR反应体系配置

按20 μL体系配制：

10 μL 2×qPCR MagicMix

2 μL 引物混合液

2 μL DNA模板

6 μL DEPC-H2O

4. 荧光定量PCR程序

（具体循环参数需根据仪器型号优化，建议参考以下通用条件）：

预变性：95℃ 5分钟

扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环）

熔解曲线分析：60℃至95℃，连续监测荧光信号。

注意事项

实验分区操作，避免交叉污染。

使用带滤芯枪头，稀释阳性对照时需更换枪头。

试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。

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