甲型流感/乙型流感双重染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

预期用途

本试剂盒适用于咽拭子、肛拭子、血清、组织渗出液、尿液等临床样本中甲型流感病毒（H1、H3亚型）和乙型流感病毒（Victoria、Yamagata谱系）RNA的特异性检测。检测结果需结合临床症状及其他实验室指标综合判断，不可作为唯一诊断依据。

检测原理

采用实时荧光定量RT-PCR技术，通过特异性引物和荧光标记探针，在扩增过程中实时监测荧光信号，实现对甲型/乙型流感病毒RNA的定性检测。反应体系为单管封闭式设计，可有效避免污染，提高检测灵敏度和特异性。

主要组成

核酸提取试剂：裂解液、洗涤液、洗脱液等。

RT-PCR反应预混液：含逆转录酶、DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等。

荧光探针混合液：甲型/乙型流感病毒特异性探针及引物。

阳性对照：甲型/乙型流感病毒RNA标准品。

阴性对照：无核酸酶水。

操作步骤

样本处理：采集样本后按规范提取RNA，建议使用配套核酸提取试剂。

反应体系配制：将提取的RNA与预混液、探针混合液按比例加入PCR反应管。

扩增检测：

逆转录：50℃ 15分钟（可选，视预混液成分而定）。

预变性：95℃ 2分钟。

扩增循环：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40个循环），于荧光通道（如FAM/VIC）采集信号。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且扩增曲线呈典型S型。

阴性：无扩增曲线或Ct值＞35。

注意事项

实验需在符合生物安全等级的实验室进行，避免交叉污染。

试剂保存于-20℃，避免反复冻融。

样本采集后应尽快检测，或于-70℃保存。

若检测结果与临床表现不符，建议复测或结合其他方法验证。

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