鸡星状病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品特点

即开即用：预混优化引物、荧光染料及反应体系，用户仅需提供DNA模板。

高灵敏度与特异性：引物针对鸡星状病毒高度保守区设计，避免与其他微生物DNA交叉反应。

双重检测功能：支持定性（病原筛查）和定量分析（线性范围达5个数量级）。

内置对照：提供阳性对照（无传染性DNA片段），便于区分假阴性结果。

兼容性：适配多数核酸提取试剂盒提取的DNA样本。

操作流程

DNA提取

使用常规核酸提取试剂盒制备样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

标准曲线制备（独立操作区）

标记6管（7-2号），每管加45 μL DEPC-H2O或专用稀释液。

取5 μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到1×10^7拷贝/μL的标准品。

依次梯度稀释至10^2拷贝/μL（6-2号管）。

PCR反应体系配制

每反应需：模板DNA 2 μL + 预混PCR Master Mix 18 μL（含染料、dNTPs、聚合酶等）。

阳性对照与阴性对照（无模板水）需同步设置。

上机检测

按以下程序运行荧光定量PCR仪：

预变性：95℃ 5 min

循环（40次）：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（采集荧光信号）

结果分析

定性：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。

定量：通过标准曲线计算样本拷贝数。

注意事项

避免反复冻融试剂，解冻后需短暂离心混匀。

标准品稀释需使用带芯枪头，防止气溶胶污染。

实验分区操作（样本制备区、PCR反应区），避免交叉污染。

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