艾特韦病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

艾特韦病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：用户仅需提供病毒样本，无需额外配制主反应混合液。

高特异性：基于艾特韦病毒保守序列设计的引物，无交叉反应风险。

高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应。

闭管检测：一管式荧光定量PCR设计，避免开盖污染。

稳定性：预混优化组分，确保结果重复性。

试剂盒组成

| 组分名称 | 规格/包装 | 备注 |

| 2×qPCR MagicMix | 500μL（棕色管） | 含荧光染料及酶 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 用于样本稀释 |

 | 艾特韦病毒PCR引物混合物 | 100μL（白盖） | 特异性引物对 |

 | 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）| 50μL（红盖） | 标准曲线制备 |

| — | 使用手册 | 1份 | 含操作流程及注意事项 |

操作步骤

1. 样本制备

使用兼容的核酸提取试剂盒提取病毒RNA，建议采用无RNase操作环境。

2. 反应体系配制（20μL体系）

按以下比例混合：

2×qPCR MagicMix：10μL

引物混合物：1μL

模板RNA：2μL

模板稀释液：补足至20μL

3. 荧光定量PCR程序

逆转录：50℃ 15分钟（若需RT步骤）；

预变性：95℃ 3分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）。

4. 数据分析

使用仪器配套软件分析扩增曲线及Ct值，阳性对照需呈现典型S型曲线。

注意事项

分区操作：样本制备、反应配制及扩增需在独立区域进行，避免气溶胶污染。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（以稀释液替代模板）及阳性对照。

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（引物混合物需分装保存）。

有效期：标注于外包装，开封后建议短期内使用完毕。

技术参数

检测限：≥200拷贝/反应

线性范围：1×10¹~1×10⁸拷贝/μL（需梯度稀释阳性对照建立标准曲线）

交叉反应：经验证与常见相关病毒无交叉。

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