鸡传染性喉气管炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

鸡传染性喉气管炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检测原理

本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术，针对鸡传染性喉气管炎病毒的特异性基因序列设计引物和探针。在PCR反应体系中加入荧光基团，通过实时监测荧光信号积累，实现对病毒核酸的定量或定性分析。

技术特点

高灵敏度：最低可检测至100拷贝/反应的病毒核酸。

强特异性：与其他禽类常见病毒无交叉反应。

快速高效：全程检测时间约1-2小时。

试剂组成

禽传染性喉气管炎荧光qRT-PCR反应液（AILT-qRT-PCR MIX）

酶混合物（Enzymes MIX）

阳性对照（AILT-PTC）

阴性对照（NTC）

无核酸酶水（Nuclease-Free Water）

操作流程

样本采集

采集气管渗出物、支气管、肺组织、肾脏或输卵管等标本。

RNA提取

使用商业化RNA提取试剂盒（如过柱法）提取核酸。

反应体系配制

按样本数+1管阴性对照+1管阳性对照计算反应管数，每管加入15μL预混液和5μL样本/对照。

qRT-PCR扩增

反应体系20μL，循环条件如下：

45℃ 10分钟（反转录）

95℃ 10分钟（预变性）

40个循环（95℃ 15秒 → 60℃ 45秒）

PCR扩增参数（适用于不同仪器）

反应体积：20μL或25μL（视具体试剂盒版本而定）。

通道选择：FAM通道采集荧光信号。

循环条件（部分版本可能略有调整）：

37℃ 2分钟（UNG处理，可选）

95℃ 3分钟（预变性）

40个循环（95℃ 5秒 → 55℃ 40秒，采集荧光信号）

结果判读

试剂盒有效性判定

阳性对照：典型S型扩增曲线或Ct值≤35。

阴性对照：Ct值＞38或无Ct值，扩增曲线为直线或轻微斜线。

样本结果判定

阳性：Ct值≤35或有明显指数增长期。

可疑：Ct值在35~38之间，需重复检测确认。

注意事项

实验操作需在符合生物安全要求的实验室进行。

避免反复冻融试剂，以免影响检测灵敏度。

不同批次的试剂盒成分可能存在优化调整，建议以实际说明书为准。

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